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SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Kit) B1027
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
| B1027 | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Kit) | 40-60块小胶 | 350元 |
描述：本产品提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制高质量的各种浓度的变性PAGE胶，方便，快捷。本试剂盒至少可以配制30块常规大小的PAGE胶，并且其中的分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS，使用时无需另外加入。
组成：
|
产品名称 |
包装 |
保存条件 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
100 ml |
2-8℃ 避光 |
|
分离胶缓冲液 |
80 ml |
室温 |
|
浓缩胶缓冲液 |
25 ml |
室温 |
|
APS（过硫酸铵） |
0.5 g |
室温 |
|
TEMED |
1 ml |
室温、避光 |
*试剂盒中提供的APS（过硫酸铵）为固体粉末，使用前加入双蒸水溶解即配制成10%APS（0.5 g APS加入5 ml双蒸水），将溶液分装后置于-20℃保存，通常半年内有效。
操作步骤：根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度，不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围参考附表1。
1．灌制分离胶（试剂使用量参考附表2）
（1）参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
（2）将不同体积的30%Acr-Bis（29:1）、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。
（3）加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌混匀，避免产生气泡。
（4）将分离胶溶液灌入凝胶玻璃槽中，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，用于压平液面。
（5）静置30-60min，至分离胶凝固。
2．灌制浓缩胶（试剂使用量参考附表3）
（1）去除覆盖在分离胶上的水层，并用滤纸吸干，水份吸不干，可能会导致浓缩胶和分离胶分开。
（2）将不同体积的30%Acr-Bis（29:1）、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。
（3）加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌混匀，避免产生气泡。
（4）将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，插入样品梳，避免产生气泡，静置20-30min，直至浓缩胶聚合。
（5）待凝胶聚合后，小心拔下梳子，以免破坏加样孔。
（6）进行常规电泳。
注意事项：
1.10%APS配置好后，应当-20℃保存，并且应尽量减少室温存放时间，以防失效。
2.TEMED易挥发，使用后请拧紧瓶盖。
3.凝胶凝聚的速度与温度等关系密切，可通过调节APS和TEMED的用量，控制凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作。
4.丙烯酰胺，TEMED等有毒，操作时请穿实验服并戴手套。
5.在凝胶配制过程中，应尽量避免产生气泡。
6.在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水时速度不宜过快。
SDS-PAGE分离胶配胶表
|
各种组份名称 |
各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量 |
|||||||
|
5 ml |
10ml |
15 ml |
20 ml |
25 ml |
30 ml |
40 ml |
50 ml |
|
|
6 % Gel |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H2O |
2.65 |
5.4 |
8.05 |
10.8 |
13.45 |
16.2 |
21.6 |
27.0 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
1.0 |
2.0 |
3.0 |
4.0 |
5.0 |
6.0 |
8.0 |
10.0 |
|
分离胶缓冲液（PH8.8） |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
|
10%APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
0.4 |
0.5 |
|
TEMED |
0.004 |
0.008 |
0.012 |
0.016 |
0.02 |
0.024 |
0.032 |
0.04 |
|
|
||||||||
|
8 % Gel |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H2O |
2.35 |
4.7 |
7.05 |
9.5 |
11.75 |
14.2 |
18.9 |
23.7 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
1.3 |
2.7 |
4.0 |
5.3 |
6.7 |
8.0 |
10.7 |
13.3 |
|
分离胶缓冲液（PH8.8） |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
|
10%APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
0.4 |
0.5 |
|
TEMED |
0.003 |
0.006 |
0.009 |
0.012 |
0.015 |
0.018 |
0.024 |
0.03 |
|
|
||||||||
|
10 % Gel |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H2O |
1.95 |
4.1 |
6.05 |
8.1 |
10.15 |
12.2 |
16.3 |
20.3 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
1.7 |
3.3 |
5.0 |
6.7 |
8.3 |
10.0 |
13.3 |
16.7 |
|
分离胶缓冲液（PH8.8） |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
|
10%APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
0.4 |
0.5 |
|
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
0.012 |
0.016 |
0.02 |
|
|
||||||||
|
12 % Gel |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H2O |
1.65 |
3.4 |
5.05 |
6.8 |
8.45 |
10.2 |
13.6 |
17.0 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
2.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
10.0 |
12.0 |
16.0 |
20.0 |
|
分离胶缓冲液（PH8.8） |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
|
10%APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
0.4 |
0.5 |
|
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
0.012 |
0.016 |
0.02 |
|
|
||||||||
|
15% Gel |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H2O |
1.15 |
2.4 |
3.55 |
4.8 |
5.95 |
7.2 |
9.6 |
12.0 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
2.5 |
5.0 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
15.0 |
20.0 |
25.0 |
|
分离胶缓冲液（PH8.8） |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
6.3 |
7.5 |
10.0 |
12.5 |
|
10%APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.25 |
0.3 |
0.4 |
0.5 |
|
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
0.012 |
0.016 |
0.02 |
SDS-PAGE浓缩胶（5%）配胶表
|
各种组份名称 |
各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量 |
|||||||
|
1 ml |
2 ml |
3 ml |
4 ml |
5 ml |
6 ml |
8 ml |
10 ml |
|
|
H2O |
0.57 |
1.15 |
1.72 |
2.29 |
2.87 |
3.44 |
4.62 |
5.69 |
|
30%Acr-Bis（29:1） |
0.17 |
0.33 |
0.5 |
0.67 |
0.83 |
1.0 |
1.3 |
1.7 |
|
浓缩胶缓冲液（PH6.8） |
0.25 |
0.5 |
0.75 |
1.0 |
1.25 |
1.5 |
2.0 |
2.5 |
|
10%APS |
0.01 |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.05 |
0.06 |
0.08 |
0.1 |
|
TEMED |
0.001 |
0.002 |
0.003 |
0.004 |
0.005 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
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