碱性磷酸酶染色试剂盒(红色) E1041
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
E1041-50 | 碱性磷酸酶染色试剂盒(红色) | 50次 | 350 |
E1041-100 | 碱性磷酸酶染色试剂盒(红色) | 100次 | 580 |
描述:碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP),也称碱性磷酸酯酶,是动物和微生物生理过程中一种非常重要的酶,常见于具有活跃转运功能的细胞膜内,如肾近曲小管的刷毛缘、小动脉内皮、肝脏毛细胆管膜、肾上腺、膀胱、肠上皮、附睾上皮的静纤毛等处。在碱性环境中可以水解各种天然及人工合成的磷酸单酯化合物底物。碱性磷酸酶与人类疾病如高磷酸酯酶血病、一些骨骼和肝脏疾病的发生有关,被用作很多疾病的辅助诊断依据;检测碱性磷酸酶的活性对于环境监测、食品质量控制等方面具有重要的作用。此试剂盒不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),结果较金属盐沉淀法灵敏可靠。该试剂盒可用于骨髓或细胞涂片、冰冻切片和梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,其染片数50~100张。
规格:100次
储存:-20℃避光保存 一年有效
操作步骤:
1. 将固红试剂管短暂离心,以防开管后,固红粉末损失,每管加纯水1.5ml溶解固红。固红溶液最好在使用当天配制。
2. 取适量固红溶液与等量的染液A混匀,用细菌滤器过滤,除去其中的渣滓及沉淀物。(剩余的未与染液A混合的固红溶液,根据下次的预期用量,分装密封避光保存于-20℃,避免反复开封与冻融,一个月内有效。)
3. 将滤液滴加到玻片组织细胞处,若是组织切片,避光室温孵育3~15min;细胞涂片或石蜡切片,避光室温孵育30~40min,若着色过浅,可适当延长孵育时间,但不要超过1.5h。
4. 自来水流水洗1-2min,流水不能直接冲在组织上,水流速度不能快,以免损坏组织。
5. 滴加染液B复染,室温孵育1-3min,水洗,方法同步骤4,若着色过浅,可适当延长孵育时间。
6. 镜检,或封片后镜检。
说明:
1. 将溶解后的固红,与染液A混合后,往往会出现红色沉淀物,是未酯化的萘酚与固红偶联形成的,过滤后溶液清明略带红色。
2. 为防止染色过程中染液蒸干,可置入湿盒中避光孵育。
3. 在组织切片中,碱性磷酸酶可被下列物质所抑制:碘液、15%醋酸、三氯醋酸、聚雌二醇磷酸酯、铍、半胱氨酸、氰化物等。某些固定剂(如甲醛、丙酮、乙醇)和包埋过程(石蜡、聚乙二醇)都可在一定程度上抑制碱性磷酸酶活性,冰冻切片的包埋剂推荐普利莱的组织冰冻切片OCT包埋剂 C1400。
4. 由于偶联重氮盐生成的有色沉淀产物不溶于水,但溶于有机溶剂,所以封片时不能使用含二甲苯的封片剂,只能甘油明胶封片剂或水溶性封片剂。
5. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
蛋白研究:蛋白提取、蛋白定量、Western Blot…核酸研究:核酸提取、PCR、核酸电泳… 抗体:单克隆抗体、多克隆抗体、酶标抗体… 细胞生物学:转染试剂、生化测定、细胞培养…
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