液体样本丙二醛(MDA)检测试剂盒 E2009
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
E2009 | 液体样本丙二醛(MDA)检测试剂盒 | 100次 | 290 |
描述:液体样本丙二醛(MDA)检测试剂盒是一种灵敏简单的检测脂质过氧化产物丙二醛的试剂盒。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物,一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物,通过检测MDA的水平可评价脂质氧化的水平,因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。
本试剂盒是一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)在较高温度和酸性环境中反应生成红色MDA-TBA加和物,MDA-TBA加和物在535nm波长具有最大吸收,据此可以通过比色法进行检测。另外MDA-TBA受535nm波长激发光激发,在553nm波长发出荧光,因此,可以通过荧光法检测MDA浓度。荧光法相对比色法灵敏度提高一个数量级。
规格:100次
储存:按说明书要求储存,12个月有效
操作步骤:
操作步骤:
1. 样品的准备
血浆样品的准备:取新鲜抗凝血液,4℃,1000g离心10分钟,上清为血浆。取上清用于MDA的测定不立即测定的样品可以-70℃保存。
血清样品的准备:取新鲜血液,室温凝固30min,2000g离心10分钟,上清为血清。取上清用于MDA测定。不立即测定的样品可以-70℃保存。
尿液样品的准备:取新鲜尿液,4℃静置30min去除不溶物,取上清用于MDA的测定。不立即测定的样可以-70℃保存。
2. 试剂盒的准备
2.1 TBA溶液的配制:将本试剂盒提供的1管50 mg TBA倒入50 ml离心管中,再加入7.5 ml TBA配置震荡2分钟溶解TBA,然后加入17.5 ml的纯水,彻底溶解TBA,可以超声助溶,即为TBA溶液,浓度为2 mg/ml。
3. 标准品的准备
比色法标准品的配制:在1.5 ml离心管中,加入950 μl纯水,再取50 μl的1 mM浓度MDA标准品加入离心管中配制50 μM浓度MDA标准品;然后取另外5根1.5 ml离心管,分别加入500 μl纯水,再吸取500 μl的 50 μM浓度MDA标准品依次倍倍稀释为25、12.5、6.25、3.12、1.56 μM浓度。
荧光法标准品的配制:在1.5 ml离心管中,加入1 ml纯水,再取5 μl的1 mM浓度MDA标准品加入离心管中配制5 μM浓度MDA标准品;然后取另外5根1.5 ml离心管,分别加入500 μl纯水,再将500 μl的5 μM浓度MDA标准品依次倍倍稀释为2.5、1.25、0.625、0.312、0.156 μM浓度。
测定方法
1. 在1.5 ml离心管中,进行配制反应溶液一般情况下,对照管每批只需做1-2支,若样本不存在溶血、脂血现象,对照管可以不做。
2. 将离心管置于95℃水浴或金属浴反应30分钟,然后冰浴冷却至室温。
3. 10000g离心10min,取200 μl上清溶液,测定吸光度(535nm)或发射的荧光强度(ex535nm-em553nm)。
数据处理
利用MDA标准品浓度为横坐标,吸光度值或发射荧光值为纵坐标制作标准曲线,并获得横纵坐标之间的函数关系式,然后利用标准曲线和各样品的吸光度值或发射荧光值计算样品的MDA浓度。
蛋白研究:蛋白提取、蛋白定量、Western Blot…核酸研究:核酸提取、PCR、核酸电泳… 抗体:单克隆抗体、多克隆抗体、酶标抗体… 细胞生物学:转染试剂、生化测定、细胞培养…
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